《不同能量狀態(tài)下運動誘導肌源性IL-6表達的機制研究》目的:IL-6是一種多效的細胞因子,運動時IL-6主要來源于骨骼肌。本研究以體外培養(yǎng)的C2C12小鼠骨骼肌成肌細胞為模型,觀察糖剝奪(Glucosedeprivation,GD)對肌源性IL-6基因表達和蛋白水平的影響,探討糖剝奪狀態(tài)下誘導肌源性IL-6表達的信號調控機制。方法:(1)培養(yǎng)C2C12細胞,誘導分化為成熟的肌管細胞。(2)以含葡萄糖4.5g/L(對照GC組)和不含葡萄糖(糖剝奪GD組)培養(yǎng)基處理細胞0、6、12、18、24小時,分別采用Real-Time PCR和雙抗夾心ELISA方法測定細胞IL-6mRNA和培養(yǎng)基中IL-6蛋白水平。(3)GD狀態(tài)下,分別加入ROS清除劑(NAC)、p38MAPK抑帶劑(SB203580)和NF-KB抑制劑(NF-KB Activation Inhibitor)阻斷與IL-6表達有關的信號通路,ELISA檢測24小時后IL-6蛋白水平。結果: (1)GD組所有時間點IL-6mRNA表達均高于GC組,其中在18和24小時差異具有顯著性(p<><><><><>0.05)。結論:(1)體外培養(yǎng)C2C12小鼠骨骼肌成肌細胞誘導分化模型成功建立,可用于糖剝奪對IL-6表達影響及其調控機制研究。(2)正常培養(yǎng)的C2C12細胞存在IL-6基因表達和蛋白釋放現(xiàn)象,糖剝奪可增強IL-6基因表達和蛋白釋放。(3)糖剝奪誘導的肌源性IL-6表達是多條信號通路共同作用的結果,ROS和p38MAPK信號通路在糖剝奪誘導肌源性IL-6表達的信號調控過程中起到主要作用。(4)NF-KB信號通路在糖剝奪誘導的肌源性IL-6表達的信號調控過程中不起主要作用。